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TS-UNG（Temperature Sensitive UNG）是经大肠杆菌重组表达获得的温度敏感型UNG酶。该酶能够催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，对RNA无活性，主要应用于PCR扩增中防止产物污染。TS-UNG酶与E.coil基因来源的常规UNG酶相比，对温度敏感、易于灭活，避免了常规UNG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dUTP扩增产物的降解作用。

利用TS-UNG酶低温消化、易于灭活的特性，它可以很好地与RT-PCR扩增反应程序相匹配，从而应用于反转录扩增防止产物污染。

• SDS-PAGE电泳纯度大于98%；
  
• 降解活性、批间差异、稳定性；
  
• 无核酸外切酶和核酸内切酶活性、RNase酶活性。

• 在20℃～37℃范围内，TS-UNG酶的活性随温度的升高有所增加，常用20℃、25℃、37℃进行反应，可对酶的用量（0.1～0.5U）及反应时间（5～10min）进行优化；特别适合RT- PCR防污染使用；
  
• 由于不同待扩增基因对dUTP的利用效率和对UNG酶的敏感度不同，因此，如果采用UNG体系导致检测灵敏度下降，应对反应体系进行调整优化；
  
• 避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有较大影响；
  
• 扩增前后要使用专用的区域和移液器，戴手套操作并经常更换，PCR反应完成后切勿打开反应管。以最大限度的减少PCR产物对样品的污染。

• TS-UNG酶可以在20℃～37℃，5～10min反应，以消化含dUTP的模板；
  
• 在50℃ 10min或95℃ 2min进行灭活。

• 按下表加入各成分配制反应体系。
  

  成分	用量	终浓度
  模板	*	＜1μg/反应
  引物1	1～5μL	0.2～1.0μM
  引物2	1～5μL	0.2～1.0μM
  dNTPs(dATP/dGTP/dCTP)	*	200μM each
  dUTP	*	400μM each
  10×PCR Buffer	5μL	1×
  25mM MgCl2	2～8μL	1.0～4.0mM
  Taq DNA聚合酶(5U/μL)	0.25μL	1.25U
  TS-UNG(1U/μL)	0.5μL(0.1～0.5μL)	0.5U(0.1U～0.5U)
  H2O	至50μL	-

  
  
• 37℃下孵育10分钟。
  
• 50℃加热10分钟或95℃加热2分钟，使TS-UNG失活。